返回首頁 在線留言 聯系我們
首頁 > 企業動態 > 原代細胞的提取方法詳細步驟

企業動態

原代細胞的提取方法詳細步驟
發布時間:2021-10-08   點擊次數:31次

原代細胞是通過一定的方法如酶法或機械法或生長法使細胞從人體和動物的母體器官、組織或液體中分離出來,并在受控環境條件下分離的細胞在體外或其他人體和動物體內生長。

原代細胞的提取方法詳細步驟:


1)整個操作要在潔凈通風的超凈臺下進行,所有的器材要高壓消毒。

2)根據BALB/c小鼠的體重,用10ml/kg3%濃度的戊巴bi妥鈉麻醉;將小鼠置于盛有75%乙醇的燒杯內,這一步不僅可以消毒,也可以讓小鼠體毛浸濕,后續剃去皮毛的時候不會沾到剪刀或組織上。

3)用鑷子輕輕挑起小鼠的心臟,裝有PBS的注射器插入心尖,同時在右心耳處剪開一個小口,緩慢推動注射器,隨著心臟的跳動,將體內的血液沖洗出來。

4)取出小鼠的肺部組織,將肺組織切成小米粒樣的大小,置于預冷的HBSS中反復沖洗幾次。

5)將小米粒大小的肺組織置于培養瓶中(培養瓶前一天用1%明膠溶液包被培養面,4度過夜,小鼠處理前,將培養瓶放置培養箱中,使其溫度恢復至37度),置于培養箱37度的環境下,消化4個小時。

6)消化4小時后,加入培養基(添加培養基,可以是正常培養時的2倍量),繼續培養24小時(繼續培養的時間可根據細胞貼壁情況適當調整)。

7)24小時后,取出肺組織,鏡下觀察細胞狀態,換液。

8)原代細胞的提取和培養是很慢的過程,一般需等到24小時后,才能在鏡下看到些許細胞群,一周到兩周后才會看到鵝卵石樣的排列情況。

9)原代細胞2-3天換液一次,因為內皮細胞生長形成單層時,會出現接觸抑制現象。所以,內皮細胞生長接近單層時就可以傳代了,不要等到長得非常滿。

分享到:

返回列表 | 返回頂部
上一篇 : 做轉染實驗,別忽視質粒中內毒素!    下一篇 :  培養基質量的控制與保存,實驗人必看!
網站首頁 公司簡介 產品中心 招聘中心 技術支持 企業動態 聯系我們 管理登陸
上海古朵生物科技有限公司版權所有 主營:優質胎牛血清,EA36染色液配制,迪夫快速染色液
GoogleSitemap ICP備案號:滬ICP備19048203號-2 技術支持:安防展覽網
在線客服
80岁老太婆牲交人与、鲁-飘雪在线观看免费完整版-西西444www大胆无码视频-国产久热精品无码激情-给个网站2021年直接进入的