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凍存細胞時,還在堅持緩凍原則嗎?
發布時間:2021-10-14 點擊次數:42次
一、我們先來說說何為緩凍:
緩凍即為凍存細胞時,要程序降溫——4℃ 30min,-20℃ 1h ,-80℃ 過夜,次日投入液氮內。
二、那為什么要進行緩凍呢?
其實所謂的緩凍是一般使用傳統凍存液凍存過程中需要程序降溫。
傳統的凍存液,一般由胎牛血清、DMSO及基礎培養基等組分組成。凍存保護的DMSO組分,在進入細胞后結合細胞內部的水份,降低冰點,防止細胞在冷凍過程中形成冰晶對細胞造成損害。
但是DMSO只能在細胞內部保護細胞,細胞外部沒有保護,水結冰晶會在細胞膜外部受到損傷,為了防止冰晶過大,使用時必須采用程序降溫的方式,才可保證細胞復蘇的成功率(80%以上)。
若不采用程序降溫的形式,有些凍存的細胞,甚至復蘇成功率為0。
三、無血清細胞凍存液幫您輕松凍細胞!
無血清細胞凍存液,為多種保護劑組合,在細胞內外進行雙重保護,大大提高了細胞復蘇存活率。無血清細胞凍存液,含多種保護劑成分。
一些保護劑,易于穿透細胞,避免細胞內部水分子形成冰晶損傷細胞,同時另一些保護劑不能穿透細胞,但可以在冰晶形成之前,優先結合細胞外的水分子,降低細胞外溶液的電解質濃度,減少陽離子進入細胞的數量,古朵無血清細胞凍存液,為多種保護劑組合,在細胞內外進行雙重保護,大大提高了細胞復蘇存活率。
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