我們在進行分子生物學實驗的時候，通常會對生物大分子的濃度有一定的要求，比如您要進行轉染實驗，加入細胞的質粒濃度要求在1 µg/µl，這樣才能得到比較高的轉染效率?？墒悄樘岬馁|粒濃度只有200 ng/µl，這時候該怎么辦呢？如何將質粒濃度濃縮到理想的濃度呢？
 

　　常用的方法有兩種：乙醇沉淀法和離心濃縮法。
 

　　乙醇沉淀法：
 

　　操作步驟：
 

　　1. 估算含有質粒溶液的體積V，加入V/9體積的3M NaAc ,使得NaAc終濃度為0.3M
 

　　2. 加入2倍體積的冷無水乙醇，冰上或者-20℃孵育20min
 

　　3. 最大離心速度(>13000rpm)離心10min，棄去上清
 

　　4. 用75%乙醇洗滌2次
 

　　5. 室溫晾干
 

　　6. 加入適當體積的水或TE buffer 溶解即可
 

　　(以上步驟來自分子克隆)
 

　　經過一系列的復雜操作，再去做一下核酸定量檢測，你往往會發現，濃度比理想的要低很多！這是因為在整個過程中比較容易產生核酸的損失，比如乙醇沉淀步驟沒有將核酸完全析出、離心步驟沒有完全將核酸完全離心下來、去除上清時不小心將核酸吸出等。
 

　　離心濃縮法：
 

　　原理：借助于真空離心濃縮儀，將待濃縮的核酸樣品放入離心機中，用真空泵提高離心機中的真空度，在低壓下核酸溶液的沸點降低，在室溫下即可快速揮發以達到濃縮核酸溶液的目的。
 

　　操作步驟：
 

　　1. 將樣品管放入離心機中
 

　　2. 設置離心機轉速、時間，點擊運行
 

　　3. 打開真空泵
 

　　4. 濃縮結束后取出樣品即可
 

　　采用離心濃縮法具有更大的優勢：
 

　　1. 操作簡單，避免復雜操作帶來樣品損失及污染
 

　　2. 濃縮速度快，100µl的待濃縮樣品濃縮至20µl大約需要40min
 

　　3. 成功率高，整個過程核酸分子均在EP管中，避免核酸損失
 

　　4. 更好的保護核酸，常溫低壓下進行核酸濃縮，避免核酸降解
 

　　因此，離心濃縮法越來越受到用戶的青睞！